產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
中文名: 細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)試劑盒
英文名: CCK-8 Cell Counting Kit-8
產(chǎn)品貨號(hào): TJ35001.TJ35002.TJ35003.TJ35004.TJ35000
供應(yīng)商: AAT Bioquest
產(chǎn)品規(guī)格: TJ35001:5ml,TJ35002:10ml,TJ35003:30ml,TJ35004:100ml,TJ35000:1ml
產(chǎn)品參數(shù)
Ex (nm): -
Em (nm):-
分子量: -
溶劑: -
存儲(chǔ)條件:在零下15度以下保存, 避免光照
Cell Counting Kit-8(cck-8)細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)試劑盒工作原理
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)試劑盒是百螢生物生產(chǎn)的一種基于 WST-8 的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),WST-8 是一種類似于 MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan)。WST-8 被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養(yǎng)基中。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺;顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長(zhǎng)處測(cè)定OD值,間接反映活細(xì)胞數(shù)量。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供上等的熒光探針。
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CCK-8法
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MTT法
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MTS法
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SRB法
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XTT法
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WST-1法
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溶解性
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水溶
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難溶
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水溶
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水溶
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水溶
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水溶
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檢測(cè)波長(zhǎng)
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450nm
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490nm
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450nm
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510nm
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450nm
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450nm
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外觀
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液體
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固體
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液體
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液體
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固體
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液體
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是否需要重新溶解
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不需要
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需要
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不需要
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需溶于Tris堿
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需要
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不需要
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便捷性
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++
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+++
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+
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++
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+++
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檢測(cè)效率
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++++
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+
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++
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+
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++
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++
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可重復(fù)性
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+
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++
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++
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+
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++
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穩(wěn)定性
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+++
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+
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+
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+++
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+
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++
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1.MTT法:MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。
2.MTS法:以生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ),比色分析對(duì)顯色反應(yīng)的基本要**:反應(yīng)應(yīng)具有較高的靈敏度和選擇性,反應(yīng)生成的有色化合物的組成恒定且較穩(wěn)定,它和顯色劑的顏色差別較大。選擇適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)和控制好適宜的反應(yīng)條件,是比色分析的關(guān)鍵。
3.SRB法:磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法,主要用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。SRB是一種粉紅色陰離子染料,易溶于水,在酸性條件下可特異性地與細(xì)胞內(nèi)組成蛋白質(zhì)的堿性氨基酸結(jié)合;在510 nm左右波長(zhǎng)下產(chǎn)生吸收峰,吸光值與細(xì)胞量成線性正相關(guān),故可用作細(xì)胞數(shù)的定量檢測(cè)。
4.XTT法:XTT是一種與MTT類似的四唑氮衍生物,可被活細(xì)胞線粒體脫氫酶還原成水溶性的棕色甲肷產(chǎn)物,當(dāng)XTT與電子偶合劑共同使用時(shí),甲肷的生成量與細(xì)胞的增殖程度呈正相關(guān)。
5.WST-1法:WST-1是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜(Formazan)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。
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Cell Counting Kit-8(cck-8)細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)試劑盒活力計(jì)算
活力計(jì)算:
細(xì)胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細(xì)胞、CCK8溶液和**溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養(yǎng)基和CCK8溶液而沒(méi)有細(xì)胞的孔的吸光度
A(0加藥):具有細(xì)胞、CCK8溶液而沒(méi)有**溶液的孔的吸光度
*細(xì)胞活力:細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
CCK-8實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵點(diǎn)(供參考):
1. 種板數(shù);
2. 2.種板后細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)時(shí)間;
3. 3.加藥后的孵育時(shí)間;
4. 4.CCK-8試劑加入量;
5. 5.CCK-8試劑加入后細(xì)胞孵育時(shí)間
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