1. 百螢Cell Meter TUNEL概述
DNA片段化代表晚期細胞凋亡的特征。凋亡細胞中的DNA斷裂可通過末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）介導的dUTP缺口末端標記（TUNEL）檢測。 TUNEL測定法依賴于DNA中存在的缺口，該缺口可通過TdT進行鑒定，TdT是一種酶，該酶催化添加標記物的dUTP的添加?，F(xiàn)有的所有TUNEL分析均包含劇毒的椰油酸鈉，這可能會誘導細胞凋亡并降低DNA的產(chǎn)生和DNA鏈。我們的Cell Meter?TUNEL細胞凋亡測定試劑盒使用了不含甲藻酸鈉的專有緩沖系統(tǒng)。該試劑盒基于將我們獨特的專有熒光染料摻入凋亡過程中形成的DNA片段中。該測定法經(jīng)過優(yōu)化，可在不使用抗體的情況下直接檢測分離的或附著的細胞中的細胞凋亡。該試劑盒可提供所有必需成分，并具有優(yōu)化的測定方案。適用于熒光酶標儀，熒光顯微鏡或流式細胞儀。
2. 百螢Cell Meter TUNEL參數(shù)
E x(nm) 549
E m(nm) 648
存儲條件 在零下15度以下保存，避免光照
3. 百螢Cell Meter TUNEL適用儀器
流式細胞儀
E x: 488nm
E m: 660/20nm
通道: PE-Cy5通道
熒光顯微鏡
Ex: TRITC濾波片組
Em: TRITE濾波片組
推薦孔板: 黑色透明底板
熒光酶標儀
Ex: 550nm
Em: 590-650nm
Cutoff: 570nm
推薦孔板: 純黑色孔板
圖1.與未處理的對照相比，用 100 nM 或 1 μM 星形孢菌素 (SS) 處理 4 小時后 HeLa 細胞中 TUNEL 反應的熒光圖像。細胞與 TUNEL 工作溶液在 37oC 下孵育 1 小時。使用具有 TRITC 濾光片組的熒光顯微鏡分析紅色熒光信號。熒光標記的 DNA 鏈斷裂在 SS 處理的細胞中顯示出強烈的熒光染色。
圖2. TUNEL 染色定義的 BM 中凋亡的 PCa 細胞。PCa細胞被泛細胞角蛋白識別為綠色，TUNEL信號以紅色顯示。比例尺，20 微米。資料來源：Axl 是 TGF-β2 誘導的骨髓中前列腺癌細胞休眠所必需的， Yumoto 等人，《科學報告》，2016 年 11 月。