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技術(shù)文章

膜電位熒光探針TMA-DPH

基本信息

貨號:214925mg

儲存條件:-20℃避光防潮

 

物理化學(xué)特性

分子量:461.62

外觀:淡黃色粉末

儲存方式:DMSO

EX=355nm

EM=430nm

 

生物應(yīng)用

TMA-DPH是用于膜流動性測量的熒光探針。 它在脂蛋白和類似類似系統(tǒng)的單層動力學(xué)研究中特別有用。 DPH及其衍生物(例如TMA-DPH)是圓柱形的并且具有熒光發(fā)射轉(zhuǎn)變偶極子,其基本上與它們的長分子軸平行排列。 因此,它們對由與周圍脂質(zhì)的相互作用引起的重新定向非常敏感。 它們廣泛用于旋轉(zhuǎn)運動的熒光偏振研究。

 

染色細胞的樣本方案

以下程序適用于大多數(shù)細胞類型。 生長培養(yǎng)基,細胞密度,其他細胞類型的存在和其他因素可能影響染色。 玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實或明顯染色,導(dǎo)致在有或沒有細胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。

 

1)通過離心沉淀細胞,并將細胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中,在pH 7.4下具有**染料結(jié)合。 培養(yǎng)物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養(yǎng)孔中原位染色。

2)制備10-50mMTMA-DPH DMSO儲備溶液。

3)在Hanks20mM Hepes緩沖液pH 7.4中使用0.55μM之間的濃度添加TMA-DPH染色,并在37℃,5CO 2培養(yǎng)箱中孵育5分鐘。 在起初的實驗中,在整個建議的范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度,以確定產(chǎn)生**染色的濃度。

4)洗滌細胞并重懸于適當(dāng)?shù)?/span>pH 7.4Hepes緩沖液中。

 

 

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