1.丙磺舒（probenecid）被報(bào)道會(huì)影響鈣離子通道，比如干擾環(huán)核苷酸門控通道，有沒有可以不用該試劑的鈣離子探針？

回答：

丙磺舒（probenecid），是一種陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑，用來降低探針進(jìn)入胞內(nèi)后被排除的幾率，以提高胞內(nèi)信號(hào)。常見的Fluo-3 、fluo-4、 Fluo-8都需要丙磺舒，否則信號(hào)會(huì)很低。您可以選擇Calbryte系列，該系列無需丙磺舒（probenecid）仍會(huì)有很好的信號(hào)，降低干擾，是不含丙磺舒（probenecid）產(chǎn)品的*佳選擇。

圖示：在存在丙磺舒（左）和不存在（右）的情況下進(jìn)行Ca²⁺檢測(cè)測(cè)定，并使用Ex / Em = 540/590的FlexStation3測(cè)量了截止波長(zhǎng)為570 nm的響應(yīng)。

2.沒有動(dòng)態(tài)讀數(shù)功能或者沒有自加樣功能的酶標(biāo)儀還能做鈣流檢測(cè)嗎？

回答：

可以。鈣流檢測(cè)的儀器常見的有FlexStation, FLIPR等，可以連續(xù)讀數(shù)并帶有自加樣系統(tǒng)，這樣就可以在秒的時(shí)間范圍內(nèi)捕捉到更完整的鈣離子濃度變化。但如果實(shí)驗(yàn)室實(shí)在用不到這樣的機(jī)器，可以考慮Cell Meter 鈣檢測(cè)免洗和免丙磺舒檢測(cè)試劑盒 (Cat# 36312)，使用普通的底讀酶標(biāo)儀就可以了。該試劑盒使用了Fluo-8E AM探針，一旦與鈣離子結(jié)合，信號(hào)增>100倍，能夠使信號(hào)維持1-2min左右，給我們自己手動(dòng)加樣爭(zhēng)取時(shí)間。

3.流式檢測(cè)鈣離子因?yàn)橐∠鹿茏蛹哟碳菀族e(cuò)過*高峰，有沒有辦法？

回答：

我們有流式檢測(cè)鈣離子試劑盒，Cat#36310，Cell Meter 鈣測(cè)定流式細(xì)胞分析試劑盒，也可以選擇Fluo-8H AM探針，因Kd比較小，可以使信號(hào)保留的時(shí)間久一些。

4.有檢測(cè)植物細(xì)胞的鈣離子探針嗎？

回答：

有的。常用的 Fluo-4 AM, Fluo-8 AM 以及 Calbryte 520 AM, 都適用于植物細(xì)胞，F(xiàn)luo-4*常用，若要獲得更好的信噪比，推薦其升級(jí)版本 Calbryte 520 AM。

5.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）或者線粒體內(nèi)的鈣離子濃度變化，分別使用什么探針？

回答：

ER鈣離子檢測(cè)可使用Kd 較高的Rhod-5N, AM (Cat# 21070). 線粒體鈣離子檢測(cè)可使用 Rhod-2 AM (Cat# 21064)。Rhod-2 在低濃度時(shí)特異識(shí)別線粒體。

6.血液等體液的里的鈣離子濃度用什么檢測(cè)方法？

回答：

人體血液里鈣離子的濃度大約在19 -10.5 mg/dL范圍內(nèi)。血液里鈣離子濃度過低或者過高可引起低鈣血癥和高鈣血癥 。 Amplite 熒光法鈣離子定量試劑盒（Cat#36360）可用于定量體液的鈣離子濃度，可使用96孔或者384孔板經(jīng)酶標(biāo)儀獨(dú)取數(shù)值。不需樣本分離直接檢測(cè)，30min可完成，*低檢測(cè)0.03mM的鈣離子。

7.熒光探針的AM、Dextran葡聚糖形式有什么區(qū)別？

回答：

AM 形式通過孵育即可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，簡(jiǎn)便。若檢測(cè)孵育時(shí)間久容易發(fā)生區(qū)室化，比如鉆進(jìn)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等亞器官內(nèi)。 Dextran*大的優(yōu)勢(shì)就是降低了區(qū)室化作用，但是需要介入方式進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，比如microinject等。

8.我們需要高通量檢測(cè)，選擇什么產(chǎn)品？

回答：下列產(chǎn)品免洗，無需去除培養(yǎng)基，加入染料孵育，直接加刺激劑即可檢測(cè)。適用于高通量。